即用型免疫组化超敏UltraSensitiveTM SAP试剂盒采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白连接的碱性磷酸酶及底物色素混合液来测定组织和细胞中的抗原。其染色步骤如下：
1、石蜡切片脱蜡、水化，自来水冲洗；
2、根据第一抗体的要求，对组织进行相应的抗原修复；
3、除去PBS，切片上滴加正常非免疫动物血清，室温下孵育10分钟；
4、除去血清，切片上滴加第一抗体，室温下孵育60分钟或4℃过夜，PBS冲洗3次，每次3分钟（3×3分钟）；
5、除去PBS，切片上滴加生物素标记的第二抗体，室温下孵育10分钟，PBS冲洗3×3分钟；
6、除去PBS，切片上滴加链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶试剂，室温下孵育10分钟，PBS冲洗3×3分钟；
7、除去PBS，切片上滴加BCIP/NBT（或AP-Red）显色试剂显色；
8、蒸馏水冲洗终止显色，核固红（或苏木素）复染，水性封固剂封固。
