MaxVisionTM HRP免疫组化染色步骤
发布时间:2011-11-3 14:45:02
即用型快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒是根据聚合物技术把辣根过氧化物酶与抗鼠/和抗兔lgG分子或抗羊IgG分子结合在多聚物上形成多聚物分子。其染色步骤如下:
1、石蜡切片脱蜡、水化,自来水冲洗;
2、根据第一种抗体的要求,对组织进行相应的抗原修复;
3、如有必要(内源性过氧化物酶含量高的组织),切片上滴加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3次,每次3分钟(3×3分钟);
4、除去PBS,切片上滴加第一抗体,室温下孵育60分钟或 4℃过夜,PBS冲洗3×3分钟;
5、除去PBS,切片上滴加MaxVisionTM/HRP试剂,室温下孵育15分钟,PBS冲洗3×3分钟;
6、除去PBS,切片上滴加新鲜配制的加强型DAB显色试剂显色;
7、自来水冲洗终止显色,苏木素复染,(如有必要可用1%盐酸乙醇分化),PBS返蓝,如果用DAB显色,则切片经梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固;如果用AEC显色,则切片不能经乙醇脱水,而直接用水性封固剂封固。